肾衰康灌肠液含药血清对HK-2细胞缺氧/复氧损伤的预防作用

目的考察肾衰康灌肠液含药血清对人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧/复氧损伤的预防作用。方法家兔灌肠给药后采血,离心取血清,分为空白组、PBS组及含药血清高、中、低剂量组。各组血清预培养HK-2细胞24 h后,将细胞随机分为对照组、PBS组及含药血清高、中、低剂量组,二氯化钴(Co Cl2)进行缺氧/复氧造模,CFSE/PI染色、Annexin V-FITC/PI双染色、流式细胞分析检测造模后细胞凋亡/死亡率,ROS荧光探针检测观察含药血清对空白组、模型组、预防组细胞ROS水平的影响,PCR技术测定PBS组、含药血清组细胞AKT、NF-κB、MAPK mRNA表达。结果与对照组、PBS组比较,含药血清组细胞死亡率明显降低,以高剂量组最显著,并表现出明显的凋亡/死亡率抑制作用。造模后,预防组细胞ROS升高水平明显低于模型组,而且恢复至正常水平时间明显缩短。含药血清组AKT、NF-κB、MAPK mRNA表达先下降(0～4 h)再逐渐上升(4～12 h),并对NF-κB、MAPK mRNA表达呈现一定剂量依赖性,与PBS组比较有显著差异(P<0. 05)。结论肾衰康灌肠液含药血清可预防HK-2细胞缺氧/复氧损伤,其机制可能与抑制细胞氧化应激、减少细胞ROS过量聚积有关。