L-肌肽对鱼藤素诱导SH-SY5Y细胞神经毒性的保护作用

The protective effect of L-carnosine on neurotoxicity of deguelin-induced SH-SY5Y cells

目的研究L-肌肽是否能通过抗氧化活性降低鱼藤素导致的神经毒性。方法 SH-SY5Y细胞在L-肌肽(1、10、20、40、60、80、100 mmol·L^(-1))中培养24 h,CCK-8法测定细胞存活率。30 mmol·L^(-1) L-肌肽、20μmol·L^(-1)鱼藤素、20μmol·L^(-1)鱼藤素与30 mmol·L^(-1) L-肌肽作用于SH-SY5Y细胞24 h,AO/EB法检测细胞形态和凋亡情况。8μmol·L^(-1)鱼藤素、8μmol·L^(-1)鱼藤素与3 mmol·L^(-1) L-肌肽、8μmol·L^(-1)鱼藤素与30 mmol·L^(-1) L-肌肽、20μmol·L^(-1)鱼藤素、20μmol·L^(-1)鱼藤素与3 mmol·L^(-1) L-肌肽、20μmol·L^(-1)鱼藤素与30 mmol·L^(-1) L-肌肽、50μmol·L^(-1)鱼藤素、50μmol·L^(-1)鱼藤素与3 mmol·L^(-1) L-肌肽、50μmol·L^(-1)鱼藤素与30 mmol·L^(-1) L-肌肽作用于SH-SY5Y细胞24 h,CCK-8法检测细胞的增殖情况;双染流式细胞术检测细胞凋亡率;DCFH-DA流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)水平。结果 20μmol·L^(-1)鱼藤素与30 mmol·L^(-1) L-肌肽共作用于细胞后,细胞抑制率降低9.07%,早期凋亡的细胞数减少,早期凋亡率降低9.35%,总凋亡率降低10.7%,ROS水平低于20μmol·L^(-1)鱼藤素组,结果差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 L-肌肽能有效降低鱼藤素诱导SH-SY5Y细胞的神经毒性,保护细胞,其机制可能与降低氧化应激水平相关。

Aim To study the protective effect of L-carnosine on deguelin-induced neurotoxicity.Methods SH-SY5Y cells were treated with 1,10,20,40,60,80,100 mmol·L^-1 L-carnosine for 24 h;cell viability was detected by CCK-8 assay.SH-SY5Y cells were respectively treated with 30 mmol·L^-1 L-carnosine,20μmol·L-1 deguelin,20μmol·L^-1 deguelin with 30 mmol·L^-1 L-carnosine for 24 h;AO/EB method was employed for observing the morphology and apoptotic morphology of treated cells.SH-SY5Y cells were respectively treated with 8μmol·L^-1 deguelin,8μmol·L-1 deguelin with 3 mmol·L^-1 L-carnosine,8μmol·L^-1 deguelin with 30 mmol·L^-1 L-carnosine,30 mmol·L^-1 L-carnosine,20μmol·L^-1 deguelin,20μmol·L^-1 deguelin with 3 mmol·L^-1 L-carnosine,20μmol·L^-1 deguelin with 30 mmol·L^-1 L-carnosine,50μmol·L^-1 deguelin,50μmol·L^-1 deguelin with 3 mmol·L^-1 L-carnosine,50μmol·L^-1 deguelin with 30 mmol·L^-1 L-carnosine for 24 h.Cell proliferation was detected by CCK-8 assay;apoptotic rate of treated cells was determined by flow cytometry;the reactive oxygen species(ROS)of treated cells was detected by DCFH-DA staining flow cytometry.Results After 30 mmol·L^-1 L-carnosine was co-treated with 20μmol·L^-1 and 50μmol·L^-1 of deguelin,the cell inhibitory rate decreased by 9.07%and 6.1%,the number of early apoptotic cells decreased,and the early apoptotic rate decreased by 9.35%.The total apoptotic rate decreased by 10.7%,and the ROS level was lower than that of the deguelin alone treatment group.The difference was statistically significant(P<0.05).Conclusions L-carnosine can effectively reduce the neurotoxicity of deguelin-induced SH-SY5Y cells,which may be related to the reduction of oxidative stress levels,thereby inhibiting apoptosis and protecting cells.