猪圆环病毒病的PCR检测分析

猪圆环病毒(PCV)的聚合酶链反应(PCR)实验用于猪血清和组织中PCV的检测、诊断和流行病学调查。该检测试验是利用离心柱内惰性大分子膜提取病料DNA作为模板,中温时在TaqDNA聚合酶作用下,以dNTP为原料,以引物为复制的起点,沿模板合成一条新链。每个环节包括高温变性、低温退火和中温延伸三个过程,使特异DNA片段的拷贝数放大1倍。经过35次循环,最终使扩增DNA片段放大了数百倍。将扩增的产物进行电泳,经染色后,在紫外灯照射下,肉眼可见到DNA片段的扩增带。分别利用PCV1和PCV2阳性对照进行检测,PCV-1阳性对照出现652bp扩增带和PCV-2阳性对照出现1154bp扩增带,阴性对照无带出现(引物带除外)时实验结果成立。从该实验中充分了解检测过程中的每一个步骤以及注意事项,充分掌握PCR检测的要点,同时更加全面地了解猪圆环病毒的知识。