miR-214在口腔鳞癌细胞中的表达及生物学分析

目的探索miR-214对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞系生物学特性的变化及miR-214表达水平对RASSF5蛋白的影响。方法取体外培养的scc-15及cal-27细胞,分别为实验组、阴性组和空白对照组,实验组分别用Lipofectamine 2000转染阳离子脂质体介导小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),阴性对照转染不针对任何基因的随机序列。转染48 h后采用实时定量反转录聚合酶链反应(quantificational revere transcriotion-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测各组细胞中mir-214表达情况,噻唑蓝(methylthiazoltetrazolium,MTT)法观察24 h、48 h、72 h各组细胞增殖能力的变化,划痕实验、Transwell实验检测24 h时各组细胞侵袭迁移能力。免疫组织化学法检测miR-214表达下调时RASSF5蛋白的变化。结果转染siRNA的2株细胞系24 h时miR-214表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05);MTT实验、划痕实验和Transwell实验表明转染miR-214抑制物的细胞系增殖能力有一定程度下降,而迁移和侵袭能力显著下降。免疫组织化学染色结果显示,miR-214下调,RASSF5蛋白表达水平上升。结论 miR-214高表达促进了口腔癌细胞的迁移与侵袭,并与抑癌蛋白RASSF5有一定的相关性。