20(S)-人参皂苷Rg3抗肝癌作用及对p16基因表达的影响

Anti-Hepatocarcinoma Effect of 20(S)-Ginsenoside Rg3 and Its Effect on p16Gene Expression

目的观察20(S)-人参皂苷Rg3干预对人肝癌细胞系SMC-7721细胞抑制率的影响,并进一步探讨其对SMC-7721细胞中p16启动子甲基化水平及p16INK4a蛋白表达的影响。方法体外培养人肝癌细胞系SMC-7721,分为空白对照组和20(S)-人参皂苷Rg3干预组。20(S)-人参皂苷Rg3干预组予以40、80、160、320和640μM不同浓度20(S)-人参皂苷Rg3干预,分别在干预24h、48h和72h使用MTT法检测细胞抑制率,计算IC50。甲基化特异性PCR法检测20(S)-人参皂苷Rg3对人肝癌细胞系SMC-7721中p16启动子甲基化水平的影响,蛋白质印记法检测人肝癌细胞系SMC-7721中p16INK4a蛋白的表达水平变化。结果 (1)不同浓度20(S)-人参皂苷Rg3干预不同时间均可不同程度抑制SMC-7721细胞存活,并呈剂量和时间依赖性;(2)不同浓度20(S)-人参皂苷Rg3干预24h、48h和72h的IC50分别为236.4μM、161.2μM和132.7μM;(3)20(S)-人参皂苷Rg3最佳干预浓度采用160μM,最佳干预时间采用48h;(4)20(S)-人参皂苷Rg3干预能够降低SMC-7721细胞中p16启动子甲基化水平;(5)20 (S)-人参皂苷Rg3干预能够显著上调SMC-7721细胞中p16INK4a蛋白的表达(P<0.05)。结论 20(S)-人参皂苷Rg3能够明显抑制SMC-7721细胞存活,发挥抗肝癌细胞的作用。20(S)-人参皂苷Rg3的抗肝癌机制可能是通过降低p16启动子甲基化水平,从而上调其转录翻译蛋白产物p16INK4a蛋白的表达来实现的。