小鼠抗猪生长抑素单克隆抗体的制备与鉴定

目的制备生长抑素(SS)单克隆抗体(mAb),并对其生物学特性进行鉴定。方法用偶联方法制备SS免疫原复合物,用免疫原复合物免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备SS mAb。用间接ELISA检测mAb的亚型及效价,用定量ELISA检测mAb 2E7的含量,用间接ELISA检测mAb的特异性和mAb在体外、体内对SS的中和作用。结果获得两株能稳定分泌SS mAb的杂交瘤细胞株2A5、 2E7,两株抗体的亚型均为IgG1,2A5效价为1∶100000,2E7效价为1∶1 000000, 2E7含量为5.4mg/mL。SS mAb只特异性地和SS纯品及SS免疫原复合物发生免疫反应,不和单纯载体蛋白(牛血清白蛋白)发生免疫反应,也不和其他肽类物质如生长激素、胰岛素、胃泌素发生交叉反应。SS mAb在体外能抑制SS和兔抗SS抗体的免疫反应,注射到体内能中和机体内的SS,从而促进生长激素的分泌。使循环血中生长激素的含量显著增加。结论成功制备了SS mAb,该mAb浓度大、效价高、特异性强,对SS功能具有较强的免疫中和作用。