仙鹤草总黄酮提取纯化工艺及体外抗肝肿瘤药效研究

目的:优化仙鹤草总黄酮提取纯化工艺条件,评价其体外抗肝肿瘤活性。方法:以乙醇浓度、料液比、提取时间为考察因素,总黄酮为评价指标,优化提取工艺条件;以树脂型号、上样浓度、上样液pH值、洗脱溶剂用量等为考察因素,总黄酮为评价指标,优化纯化工艺条件;MTT法检测仙鹤草总黄酮提取物及纯化物对人肝癌细胞HepG2的抑制作用。结果:最佳提取工艺条件为:16倍量60%乙醇回流提取2次,每次1.5 h,总黄酮得率达10.68%,纯度达46.13%;最佳纯化工艺条件为:以D101型大孔吸附树脂为吸附剂,上样液浓度为0.2 g/mL(生药),上样液pH为5,上样量为0.6 g/mL(药材/湿树脂),上样体积流量为2 BV/h,水除杂用量为4 BV,8 BV的60%乙醇以2 BV/h体积流量进行洗脱,总黄酮得率达4.19%,纯度达91.71%;仙鹤草总黄酮纯度提高45%后,IC50由1.36 mg/mL降为0.65 mg/mL。结论:优选的提取纯化工艺条件稳定、简单、可行,可用于提取纯化仙鹤草总黄酮,该研究为仙鹤草总黄酮开发为抗肝肿瘤新药奠定实验基础。