let7a在非小细胞肺癌顺铂耐药中的作用及相关机制研究

目的:研究let7a 在非小细胞肺癌顺铂耐药中的作用及相关机制。方法:将人非小细胞肺癌细胞系A549 及其耐药株A549/DDP 作为本次实验对象进行培养,耐药细胞株需要DDP 维持。培养并提取细胞总RNA,let7a 用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其在细胞中的表达水平。实验组A549 中转染let7a 在抑制物A549/DDP 耐药株中转染let7a模拟物,对照组均不转染。将A549 和A549/DDP 加入顺铂中维持培养,并使用cck8 试剂检测细胞存活情况,采用细胞克隆平台的方法,检测转染前后细胞增殖扩增情况,细胞凋亡情况由流失细胞检测仪检测。结果:RT-PCR 检测let7a 在A549 与A549/DDP 中的表达水平结果显示,A549/DDP 中表达水平是A549 细胞的(25.54±2.90)%,差异有统计学意义(P<0.05);A549 转染let7a 抑制物后对顺铂的敏感度下降,差异有统计学意义(P<0.05);A549 和A549/DDP 转染let7a 抑制物后对顺铂的敏感性增加,差异有统计学意义(P<0.05)。A549 转染let7a 抑制物后,细胞形成的克隆集落数量多于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);A549/DDP 转染let7a 抑制物后细胞形成的克隆集落数量少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);A549 转染let7a 抑制物后细胞凋亡率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);A549/DDP 转染let7a 抑制物后细胞凋亡率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:let7a 表达量下降可以促进A549 和A549/DDP增殖,抑制细胞凋亡,出现顺铂耐药现象。