2型糖尿病患者外周血单个核细胞中miR-375的表达及调控研究

目的探讨2型糖尿病患者外周血单个核细胞中miR-375的相对表达,进一步探讨其潜在的调控机制。方法收集我院2015-2016年20例初诊的2型糖尿病患者及20例健康对照者外周抗凝全血,运用Ficoll法分离外周血单个核细胞;运用实时荧光定量PCR检测基因的相对表达量;运用生物学信息软件targetscan7.0预测miR-375调控的靶基因;采用常规法培养细胞;并构建双荧光报告基因载体验证miR-375与靶基因的结合作用。结果PRKD1是miR-375调控的靶基因之一,miR-375在2型糖尿病患者外周血单个核细胞中呈高表达,而PRKD1呈低表达,两者的相对表达量具有负相关性。共转染WT-PRKD1-3’UTR表达载体与miR-375mimics至HT29细胞,荧光活性明显减弱,差异具有统计学意义(P<0.05),转染mut-PRKD1-3’UTR表达载体与miR-375mimics至HT29细胞,荧光活性无显著改变(P>0.05);抑制miR-375的表达,促进PRKD1的表达。结论2型糖尿病患者外周血单个核细胞中miR-375的表达显著升高,PRKD1是其潜在的靶基因。这为揭示2型糖尿病的发病机制提供了线索。