微小RNA-140-5p靶向EGR-2基因调控胃癌细胞增殖凋亡的作用研究

Effect of microRNA-140-5p on regulating proliferation and apoptosis of gastric cancer cells by targeting EGR-2

目的探讨microRNA-140-5p(miRNA-140-5p)在胃癌患者组织中的表达及其对癌细胞增殖、凋亡的影响。方法收集2017年5月到2018年5月杭州市肿瘤医院住院的100例胃癌患者的组织样本,利用荧光定量PCR检测miRNA-140-5p在胃癌组织和癌旁组织中的表达并分析其临床意义。采用CCK-8法、Annexin V-FITC/PI双染法分析miRNA-140-mimics、miRNA-140-inhibitor对人胃癌细胞系BGC-823增殖和凋亡的影响,以及检测其对胃癌细胞TGF-β、ERK1、Smad2、IGF-1R、PI3K、Ras、AKT、MAPK、Ki67基因表达的影响。采用生物信息学、Western Blotting、双荧光素酶报告实验等方法预测并验证miRNA-140-5p的下游靶基因。结果胃癌患者癌组织中miRNA-140-5p的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.001);ROC曲线示miRNA-140-5p诊断胃癌的曲线下面积为0.803(95%CI:0.723~0.851);与对照组相比,miRNA-140-mimics组中的细胞增殖率明显降低而凋亡率升高(均P<0.05);TGF-β,ERK1,Smad2,IGF-1R,PI3K,Ras,AKT,MAPK mRNA表达,以及Ki67蛋白表达明显下调(P<0.05);Targetscan数据库预测和双萤光素酶检验结果发现早期生长反应蛋白2(EGR2)是miRNA-140-5p的下游靶基因之一,较于空白对照组,miRNA-140-mimics组中EGR2含量降低(P<0.001)。结论 miRNA-140-5p在胃癌组织中表达下调,可能通过靶向EGR2来调控胃癌细胞的增殖与凋亡, miRNA-140-5p有可能成为胃癌诊断和新型生物治疗的靶点。