应用组织芯片技术分析磷酸化53BP1在结肠癌中的表达及其意义

p53结合蛋白1(p53 binding protein,53BP1)是一种参与DNA损伤检查点活化和DNA损伤修复的关键蛋白之一。已知在结肠癌中,BRCA1基因的突变会使患结肠癌的风险增加,而磷酸化53BP1是其功能的表现形式。为研究磷酸化53BP1与结肠癌发生发展的关系,我们制备特异性磷酸化53BP1多克隆抗体,经RNA干扰技术、蛋白免疫共沉淀(Co-IP)、蛋白免疫印迹(WB)等实验验证抗体的特异性。随后通过免疫组织化学染色(IHC)方法对31例临床结肠癌组织标本进行染色,并结合临床病例资料进行分析。实验结果表明,磷酸化53BP1在结肠癌组织中的表达明显高于癌旁组织,且在TNM分期Ⅰ-Ⅱ期结肠癌患者中,磷酸化53BP1高表达病例数比例(13/16)显著高于Ⅲ-Ⅳ期患者中的高表达病例数比例(7/15)(p<0.05),同时磷酸化53BP1高表达病例数比例在未发生淋巴结转移和发生淋巴结转移的病例中差异显著(p<0.05)。这些研究结果表明,磷酸化53BP1高表达可作为结肠癌分期(Ⅰ-Ⅱ期)和未发生淋巴结转移的潜在标志。