孟河医派特色炮制猪心血丹参及其他炮制品对大鼠脑缺血保护及PI3K/AKT信号通路的影响

目的比较孟河医派特色炮制猪心血丹参及其他炮制品抗脑缺血作用差异,并从PI3K/AKT凋亡信号通路阐明其抗脑缺血分子机制。方法采用线栓法构建局灶性脑缺血大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、丹参生品组、猪心血丹参组、猪血丹参组和酒丹参组。采用Longa评分法进行神经行为学评分,TTC染色法考察脑梗死情况,TUNEL法检测神经细胞凋亡的情况,Western印迹法检测p-PI3K/t-PI3K、p-AKT/t-AKT、Bcl-2/Bax、活化胱天蛋白酶3和活化胱天蛋白酶9表达水平。结果神经功能评分、TTC染色和TUNEL细胞凋亡结果均显示,与模型组比较,孟河医派特色炮制猪心血丹参及其他炮制品均能显著抑制脑缺血大鼠神经行为学评分、脑梗塞体积及神经细胞凋亡指数(P<0.01),且抑制顺序为猪心血丹参组>酒丹参组>猪血丹参组>丹参生品组。Western印迹结果显示,孟河医派临方特色炮制猪心血丹参能显著促进p-PI3K/t-PI3K,p-AKT/t-AKT和Bcl-2/Bax蛋白比值水平(P<0.05,P<0.01),显著抑制活化胱天蛋白酶3和活化胱天蛋白酶9蛋白水平(P<0.01),且均比丹参生品及其他炮制品调控更显著。结论明确猪心血能显著促进丹参抗脑缺血作用,其机制可能是通过调控PI3K/AKT凋亡信号通路对脑缺血大鼠进行保护。