鸡传染性贫血病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

Establishment and Preliminary Application of Real-time Fluorescence Quantitative PCR for Detection of Infectious Anemia Virus in Chickens

研究旨在建立一种适用于鸡传染性贫血病毒(CIAV)检测的荧光定量PCR技术。制备含有CIAV-Y43株目的片段的DNA作为标准品,10倍比稀释后建立标准曲线,测定敏感性。同时采用标准品对该方法的批内和批间重复性进行检测,并对多种病毒进行特异性检测。结果显示:建立的荧光定量PCR方法能在CIAV-Y43毒株DNA样本中检出荧光信号,最低检出量为10~1拷贝/μL,线性范围达9个数量级;该方法重复性良好,批内重复试验结果变异系数小于1%,批间变异系数平均值小于6%。上述结果说明该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可在3 h内得到检测结果,适用于临床样品中鸡传染性贫血病毒的快速检测。