三水白虎汤含药血清抗滑膜成纤维细胞迁移的机制研究

目的探讨三水白虎汤(SSBH)含药血清对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(SFs)侵袭、迁移的影响。方法划痕实验观察SFs的迁移状况,Transwell实验统计穿膜细胞数。筛选出SSBH最适干预浓度后,各组transwell下室分三个浓度的软骨粉,统计穿膜细胞数。共培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和荧光标记的RASFs,荧光显微镜下粘附细胞计数,WB检测粘附分子(ICAM-1、VCAM-1)表达。结果划痕实验显示SSBH组、拆方组、sp600125组细胞迁移率较NS组均有降低(P<0.05),SSBH对迁移的抑制强度与药物浓度和作用时间呈正相关(P=0.000);sp600125组的抑制作用强于10%、20%SSBH组(P<0.05);拆方组除C1组抑制作用与10%SSBH组无显著性差异(P>0.05),余2组均弱于SSBH组(P<0.05)。Transwell实验示相较NS组,余组透膜细胞数均减少(P<0.05),SSBH组的抑制作用随浓度升高而增强;sp600125组透膜细胞数少于SSBH组(P<0.05);拆方组抑制作用均弱于SSBH组(P<0.05)。添加软骨粉后Transwell实验,随浓度增加各组透膜细胞数增多(P=0.000),20%SSBH组透膜细胞数多于其它2组(P<0.05)。SSBH组与sp600125组分别抑制(79.3±4.1)%、(83.8±7.6)%的细胞粘附;SSBH组与sp600125组的ICAM-l和VCAM-l的表达量均降低,组间均有统计学差异(P<0.05)。结论 SSBH对RASFs的侵润迁移产生明显的抑制,可能与抑制JNK信号通路有关,其最适干预浓度为20%。C1为抑制作用最强的拆方。细胞外基质暴露对RASFs的迁移具有明显促进作用。SSBH可降低RASFs与HUVEC粘附的能力,其机制可能与降低ICAM-l和VCAM-l的表达有关。