干鳕鱼皮胶原低聚肽粉对实验性哮喘模型小鼠的影响及机制

目的探讨干鳕鱼皮胶原低聚肽粉(CP)对实验性哮喘发生的影响及其机制是否为通过调节NOD样受体蛋白(NLRP)3炎症小体的表达而实现。方法雄性Balb/c小鼠50只随机分为正常组、模型组和CP低(300 mg/kg)、中(600 mg/kg)、高(900 mg/kg)剂量组。除正常组外其余各组全程以CP灌胃的方式建模,按照浓度进行给药,在第1、7、14天,以腹腔注射的方式给予2.5 mg/ml卵清蛋白和氢氧化铝佐剂(OVA-Alum)溶液,每只0.2 ml,在第17、18、19天以雾化吸入的方式给予1%OVA-生理盐水溶液持续激发30 min。正常组小鼠灌胃、腹腔注射及雾化激发均采用生理盐水。第21天乙醚麻醉处死小鼠,取肺组织保存于-80℃冰箱备用。分别采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、Western印迹法及免疫组织化学(IHC)法检测肺组织中白细胞介素(IL)-4、 IL-5、 NLRP3、凋亡相关颗粒样蛋白(ASC)、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1含量,并使用苏木精-伊红(HE)染色及Masson染色观察肺组织切片中炎症细胞聚集和胶原纤维沉积等肺组织病理学改变。结果模型组肺组织中IL-4、 IL-5、 NLRP3、 ASC、 Caspase-1 mRNA和蛋白质表达水平均明显高于正常组(P<0.05,P<0.01)。CP低、中、高剂量组肺组织中IL-4、 IL-5、 NLRP 3、 ASC、 Caspase-1 mRNA和蛋白质表达水平均低于模型组,其中高剂量组差异均显著(P<0.05,P<0.01)。肺组织切片染色结果显示模型组炎症细胞聚集于胶原纤维沉积与正常组相比均明显增多,而CP低、中、高剂量组组织学改变明显减少。结论 CP对实验性哮喘模型小鼠具有预防性保护作用,其机制与抑制IL-4、 IL-5的产生及NLRP 3炎症小体活化有关。