重组菌低温冷冻保藏试验

Experiment for Recombinant Bacteria Storage by Deep Freezing

综述了菌种保藏方法及研究进展。试验对比了不同浓度甘油冷冻保存不同重组大肠杆菌菌株的效果。冷冻保存360 d后测试表明,含质粒菌活细胞数15%甘油组>25%甘油组>8%甘油组,其中P38活细胞数>GFP活细胞数>4T-1活细胞数,8%甘油组与15%甘油组的质粒含量大小无差异;而无质粒菌活细胞数25%甘油组>15%甘油组>8%甘油组,且BL21的活细胞数>TOP10的活细胞数。37℃培养菌落时,含质粒菌需20~22 h,无质粒菌只需16~18 h。-20℃冷冻保藏重组大肠杆菌时,宜在菌液OD600值为1.0,甘油终浓度保持15%~25%为佳。