小剂量甲氨蝶呤对子宫内膜异位症异位内膜细胞迁移及侵袭的影响

目的分析子宫内膜异位症异位内膜细胞的迁移、侵袭能力,并探讨小剂量甲氨蝶呤对其的影响及可能的机制。方法原代分离培养卵巢子宫内膜异位囊肿及正常子宫内膜组织,迁移实验、侵袭实验比较子宫内膜癌细胞系Ishikawa、异位内膜及正常子宫内膜间质细胞和腺体细胞的生物学行为。划痕愈合实验及侵袭实验比较不同浓度甲氨蝶呤作用下子宫内膜异位症细胞的迁移及侵袭能力,蛋白印迹法分析细胞中核因子κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白的表达水平。结果Ishikawa细胞、异位内膜间质细胞、异位内膜腺体细胞、正常子宫内膜间质细胞、正常子宫内膜腺体细胞的迁移细胞数依次为(110±5)、(109±7)、(89±4)、(62±5)、(42±5)个,侵袭细胞数依次为(148±14)、(144±7)、(100±7)、(74±10)、(47±6)个;异位内膜间质细胞的迁移及侵袭细胞数与Ishikawa细胞比较,差异均无统计学意义(P均>0.05),异位内膜间质及腺体细胞、正常子宫内膜间质及腺体细胞的迁移、侵袭细胞数依次减少,两两比较,差异均有统计学意义(P均<0.01)。0、0.1、1、10 nmol/L甲氨蝶呤作用子宫内膜异位症细胞后,划痕愈合面积依次为(95.8±8.1)%、(88.7±2.3)%、(80.8±2.1)%、(68.8±9.8)%,组间比较,差异均有统计学意义(P均<0.05),且划痕愈合面积随着甲氨蝶呤浓度的增加而减少(r=-0.761,P<0.01)。4种浓度下侵袭细胞数依次为(210±13)、(185±15)、(146±13)、(112±11)个,组间比较,差异均有统计学意义(P均<0.01),且侵袭细胞数随着甲氨蝶呤浓度的增加而减少(r=-0.802,P<0.01)。NF-κB、MMP-9的蛋白表达水平与甲氨蝶呤浓度均呈负相关(r=-0.738、-0.721,P均<0.01)。结论子宫内膜异位症异位内膜细胞的迁移及侵袭能力强于正常子宫内膜细胞,小剂量甲氨蝶呤局部应用可能对子宫内膜异位症有一定的治疗作用。