天蚕片、天蚕胶囊中僵蛹成分鉴定

目的基于特异性引物扩增建立中成药中僵蛹成分的鉴定技术。方法根据家蚕、白僵菌和绿僵菌的全基因组序列差异设计了特异性引物PM、PB和PA,采用CTAB法、三氯甲烷抽提法从供试品中提取与纯化DNA,并进行聚合酶链式反应(PCR),扩增产物以2%琼脂糖凝胶电泳检测。结果家蚕、白僵菌及绿僵菌的DNA经扩增后分别在61、94、144 bp处产生条带,且引物间无交叉反应,体现出很强的专属性,家蚕、白僵菌和绿僵菌DNA的检出限分别为1、0.1、1 ng。在6批天蚕片和天蚕胶囊中,均检测出家蚕和白僵菌,未检测出绿僵菌。结论该方法准确快速,可用于鉴定天蚕片和天蚕胶囊中的僵蛹成分。