建立可量化的体外血小板、牙龈炎生物模型--研究牙膏的功效作用

目的:研究并运用可量化的体外血小板生物模型、牙龈上皮细胞(HEGCs)炎症模型与体内大鼠牙龈炎模型,从诸多层面研究添加有白芨提取物或氨甲环酸牙膏的功效作用。方法:①建立新型的体外血小板生物模型,通过研究血小板聚集率、环磷酸腺苷(cAMP)和血栓素B 2(TXB 2)含量指标,综合评价添加白芨提取物或氨甲环酸的牙膏对牙龈止血的功效。②研究建立脂多糖(LPS)诱导的HEGCs炎症模型,可量化地检测细胞因子IL-10、IL-6、IL-1β、TNF-α含量,据此评价添加白芨提取物或氨甲环酸的牙膏在抗炎方面的作用。③建立大鼠牙龈炎模型,综合运用X-ray形态观察、记录牙龈指数(GI)、菌斑指数(PI)、探针出血指数(BOP)、检测口腔唾液中免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)以及大鼠血浆中细胞因子IL-10、IL-6、IL-1β、TNF-α含量等,全面验证本研究建立的体外血小板、牙龈炎生物模型的有效性。结果:①在可量化的体外血小板生物模型方法研究中:添加白芨提取物或氨甲环酸牙膏的血小板聚集率比正常血浆高8.6%~40.4%,cAMP含量比正常血浆中低122nmol/L^328nmol/L(P<0.001),TXB 2含量比正常血浆中高1.6ng/L^6.3ng/L(P<0.05);血小板生理反应的3项指标综合表现出添加白芨提取物或氨甲环酸牙膏止血效果的显著性。②体外HEGCs牙龈炎症模型实验中,添加有白芨提取物或氨甲环酸牙膏的HEGCs所分泌的细胞因子与阴性对照牙膏的比较结果为:抗炎因子IL-10含量比阴性对照牙膏组高21ng/L^90ng/L(P<0.01)、炎症因子IL-6含量比阴性对照牙膏组低12ng/L^45ng/L(P<0.01)、炎症因子IL-1β含量比阴性对照牙膏组低1ng/L^7ng/L(P<0.05)、肿瘤坏死因子TNF-α含量比阴性对照牙膏组低3ng/L^23ng/L(P<0.05),且均具有统计学意义。③用于验证的大鼠牙龈炎模型,X-ray影像及牙龈探针诊断指数(PI、GI、BOP)也同时显示出,添加白芨提取物或氨甲环酸的牙膏组的牙龈组织有明显的修复作用。并且大鼠唾液中的IgA、IgM、IgG含量分别比牙龈炎对照组增加52ng/L^446ng/L(P<0.01)、0.5ng/L^1.8ng/L(P<0.05)、0.01ng/L-0.8ng/L,同时大鼠血浆中的细胞因子IL-10、IL-6、IL-1β、TNF-α含量变化明显(P<0.05)。从而有效地验证了研究建立的体外血小板生物模型和HEGCs炎症模型与体内动物牙龈炎特征指标具有正相关性,结果表明本研究建立的体外生物模型的可靠与有效性。结论:研究显示添加白芨提取物或者添加氨甲环酸的牙膏在大鼠体内模型与体外血小板生物模型上的止血效果呈正相关性,同时动物体内炎症介质和细胞因子的抑制作用与体外HGECs牙龈炎模型的检测结果也显示出良好的一致性,为未来逐渐淘汰动物体内炎症模型提供了可靠的方法依据。