痰凝血瘀证喉癌移植瘤动物模型的建立和评价

目的构建痰凝血瘀证喉癌移植瘤动物模型,并进行评价,以期用于后续实验研究。方法喉癌Hep2细胞株通过质粒转染将luciferase(荧光素酶)稳定表达在人喉癌细胞株Hep2上,获得稳定表达的Hep2-luciferase-GFP细胞株;采用高脂饲料喂养+冰水游泳+盐酸肾上腺素皮下注射的方法建立痰凝血瘀证候,证候造模期间观察裸小鼠的一般情况,记录体重、饮水量、摄食量,2周后检测血浆中血脂凝血指标。在成功的痰凝血瘀证裸小鼠皮下注射Hep2-luciferase-GFP细胞株成瘤,构建痰凝血瘀证喉癌异位移植瘤动物模型。在种瘤第0、5、7、9、11、13天记录瘤体长宽度,计算肿瘤体积,并在动物取材当天运用小动物活体成像仪拍摄动物肿瘤荧光强度。结果与空白组比,模型组饮食和饮水量整体上更少,但两组比较差异无统计学意义。而体重变化上,在造模1周后,相比模型组,空白组小鼠体重增长速度更快,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。进行"痰凝血瘀证"裸小鼠证候造模后,动物血浆中血脂和凝血功能检测结果示:与空白组比较,模型组总胆固醇(TC)、非高密度脂蛋白胆固醇(nonHDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)均比空白组高,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。且模型组活化部分凝血酶原时间缩短,与空白组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。正常组全身皮肤颜色淡红,接触皮肤温暖,大便正常,舌质红润,少量瘀斑;模型小鼠全身皮肤紫暗,接触皮肤温度低,大便黏腻,不成形,舌质暗黑且偏干。与空白组比较,证候模型组荷瘤生长速度快,从种瘤第9天开始,模型组瘤体体积增长速度明显加快,与空白组相比,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.001)。结论成功构建痰凝血瘀证候裸小鼠模型,且成功在证候模型上建立喉癌异位移植瘤,痰凝血瘀证模型相比空白组表现出更易成瘤,瘤体生长速度快等特征。