鸡传染性喉气管炎和新城疫病毒双重PCR检测方法的建立

为了构建鸡传染性喉气管炎病毒(Avian Infectious Laryngotracheitis, AILT)和鸡新城疫病毒(Newcastle disease, ND)双重检测方法,本文以鸡传染性喉气管炎病毒和鸡新城疫病毒的基因保守序列为基础,进行2对特异性引物及2条非一致荧光基团标记的TaqMan探针设计与试验。优化、调整反应条件后,建立鸡传染性喉气管炎病毒和鸡新城疫病毒双重PCR检测方法。这种双重PCR检测方法对传染性喉气管炎病毒和鸡新城疫病毒监测灵敏度为10拷贝/L,相对于常规OCR检测方法灵敏度提高100倍,并且该PCR检测方法对禽流感病毒、鸡白血病病毒等检测结果均为阴性,具备良好的特异性,此外该检测方法批内和批间的重复变异系数都<2%。使用鸡传染性喉气管炎病毒和鸡新城疫病毒双重PCR检测方法对比常规的检验方法测试150份组织样品,达到100%的正确率,该方法可以作为鸡传染性喉气管炎病毒和鸡新城疫病毒的快速检测手段。