甘草次酸抑制骨肉瘤细胞MG63增殖的NF-κB信号通路机制

Glycyrrhetinic acid inhibits proliferation of osteosarcoma cell line MG63 by inhibiting NF-κB signaling pathway

目的:探讨甘草次酸抑制骨肉瘤细胞MG63增殖的机制。方法:实验应用骨肉瘤细胞MG63作为研究对象,分5组。空白组、甘草次数组(50μmol/L、100μmol/L和200μmol/L)、阳性对照组。每组6个复孔。空白组为不含有甘草次酸的DMEM的培养基,甘草次酸组分别加入50μmol/L、100μmol/L和200μmol/L的甘草次酸,阳性对照组加入白藜芦醇(40μmol/L)。将细胞接种于培养瓶内,当细胞进入生长平台期后使用0.1%的胰酶消化并按1×106 cells/ml的密度接种于96孔板中,继续培养24 h。采用甲基四氮唑蓝检测细胞的增长率,Annexin V/PI双标记流式细胞术检测骨肉瘤细胞MG63的凋亡,蛋白质印迹法检测NF-κB蛋白的表达。结果:与空白对照组相比,甘草次酸孵育24 h后,各组的骨肉瘤细胞G63增殖率明显降低(P<0.05)、凋亡细胞比例明显升高(P<0.05);甘草次酸孵育48 h后,骨肉瘤细胞G63增殖率和NF-κB蛋白的相对表达量均明显降低(P<0.05)、凋亡细胞比例明显升高(P<0.05)。与阳性对照组比较,甘草次酸孵育24 h后,50μmol/L甘草次酸组的细胞增殖率显著增高、100μmol/L和200μmol/L甘草次酸组的骨肉瘤细胞的增殖率显著降低(P<0.05),甘草次酸孵育48 h后,50μmol/L组和100μmol/L组骨肉瘤细胞的增殖率显著升高,而200μmol/组显著降低(P<0.05);甘草次酸孵育24 h后,50μmol/L、100μmol/L和200μmol/L组的骨肉瘤细胞的凋亡率均显著降低(P<0.05);而甘草次酸孵育48 h后,50μmol/L、100μmol/L组的骨肉瘤细胞的凋亡率也显著降低,而200μmol/L组的凋亡率则显著升高。各剂量组间比较,200μmol/L甘草次酸组的效果最佳,差异有显著性(P<0.05);孵育48 h后,200μmol/L甘草次酸组的效果无论在骨肉瘤细胞的增殖率还是凋亡比例其效果均优于阳性对照组(P<0.05)。结论:甘草次酸对骨肉瘤细胞G63增殖有抑制作用,其机制可能通过影响NF-κB信号通路,达到抑制骨肉瘤细胞MG63增殖的作用。