核糖体相关蛋白Kri1l影响斑马鱼脑部发育

目的:探讨Kri1l基因突变对斑马鱼脑部发育的影响。方法:通过正向遗传学的手段发现Kri1l基因突变的斑马鱼系,在光镜下观察野生型与突变型的表型。采用全胚胎原位杂交技术,检测神经发育相关转录因子sox2的表达情况。为了进一步探究脑部神经发育异常,用Tg(Kri1l+/-)与Tg(HuC:EGFP)泛神经元转基因鱼系进行杂交,得到Tg(Kri1l+/-;HuC:EGFP)双转基因系,绿色荧光标记神经元。利用激光共聚焦显微镜观察野生型和突变型胚胎脑部神经元的变化;通过TUNEL染色观察脑部神经元细胞凋亡的情况。结果:在光镜下Kri1l突变胚胎的中脑区域变小,神经元明显减少。通过激光共聚焦显微镜观察Tg(Kri1l+/-;HuC:EGFP)双转基因系的脑部神经元,发现Kri1l突变型胚胎脑部神经元明显减少,且神经元的减少开始于受精二天之后。通过全胚胎原位杂交发现,脑部早期神经干细胞发育没有异常。TUNEL染色结果提示Kri1l突变胚胎神经元凋亡增加。结论:Kri1l基因突变导致斑马鱼脑部发育异常,其机制可能是通过引起脑部神经元的凋亡来实现的。