摘要
目的探讨微小RNA-184(miR-184)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其作用的分子生物学机制。方法利用qRT-PCR与Western印迹技术分别检测舌鳞癌细胞系及正常口腔黏膜细胞中miR-184、ZNRF3 mRNA及蛋白表达水平。将anti-miR-184、si-ZNRF3及其阴性对照分别或共同转染入舌鳞癌细胞SCC-9中,采用噻唑蓝(MTT)与Transwell法检测转染后各组细胞增殖、迁移及侵袭能力的改变。双荧光素酶报告基因方法检测miR-184与ZNRF3的靶向关系。Western印迹法检测细胞增殖、迁移、侵袭及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白表达。结果相对于正常口腔黏膜细胞,OSCC细胞系中miR-184表达水平显著上调,而ZNRF3 mRNA及蛋白表达水平显著下调;双荧光素酶报告基因实验验证ZNRF3是miR-184的靶基因;SCC-9细胞中转染anti-miR-184能显著抑制miR-184表达水平,降低SCC-9细胞增殖、迁移及侵袭能力,而共转染si-ZNRF3可逆转anti-miR-184对SCC-9细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用;沉默miR-184后SCC-9细胞中CDK4、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-9、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平显著下调,而β-catenin、E-cadherin蛋白表达水平显著上调,而共转染si-ZNRF3可逆转其作用。结论miR-184可通过抑制ZNRF3表达调控EMT进程进而促进OSCC细胞增殖、迁移及侵袭。
出处
《中国老年学杂志》
CAS
北大核心
2021年第5期1075-1080,共6页
Chinese Journal of Gerontology