外周血单核细胞中PPARγ表达对脓毒症的影响及作用机制

目的探讨外周血单核细胞中过氧化物酶体增殖体激活受体(PPAR)γ表达对脓毒症的影响及作用机制。方法收集脓毒症患者、健康志愿者各70例,采集外周静脉血分离单核细胞,RT-PCR检测细胞中PPARγ、miRNA-146a的表达;使用不同浓度的PPARγ激动剂罗格列酮处理外周血单核细胞,检测细胞中miRNA-146a、Smad4表达;细胞转染含miRNA-146a启动子的报告基因质粒,给予PPARγ激动剂或拮抗剂处理,检测报告基因活性;使用PPARγ激动剂或拮抗剂处理细胞后使用脂多糖诱导,酶联免疫吸附试验测定细胞培养上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-8浓度。结果脓毒症组患者外周血单核细胞中PPARγ和miRNA-146a的相对表达量均明显低于对照组(P<0.05),且PPARγ与miRNA-146a的表达呈正相关。5.0μmol/L罗格列酮组、2.0μmol/L罗格列酮组外周血单核细胞中miRNA-146a表达水平明显高于0.5μmol/L罗格列酮组和对照组,Smad4表达水平明显低于0.5μmol/L罗格列酮组和对照组(P<0.01)。5.0μmol/L罗格列酮组、2.0μmol/L罗格列酮组外周血单核细胞中Smad4蛋白相对表达量明显低于0.5μmol/L罗格列酮组和对照组(P<0.01)。PPARγ激动剂组miRNA-146a启动子表达水平明显高于对照组(P<0.01)。PPARγ激动剂组TNF-α、IL-6、IL-8水平明显低于PPARγ拮抗剂组及对照组,PPARγ拮抗剂组TNF-α、IL-6、IL-8水平明显高于对照组(P<0.01)。结论PPARγ活化能够上调miRNA-146a的表达,降低下游靶基因Smad4活性,进而抑制炎症因子的分泌,缓解脓毒症患者病情。