miR-29a-3p靶向组蛋白去乙酰化酶4对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的影响

目的探讨微小RNA(miR)-29a-3p是否通过调控组蛋白去乙酰化酶(HDAC)4表达影响高糖诱导的小鼠足细胞损伤。方法体外培养小鼠肾脏足细胞系MPC5,饥饿处理后随机分为正常对照(NG)组、高糖刺激(HG)组,分别将miR-29a-3p mimic、miR-NC、HDAC4 siRNA及si-NC转染至HG组MPC5细胞中,采用qRT-PCR、Western印迹分别检测miR-29a-3p与HDAC4蛋白表达,采用流式细胞术检测MPC5细胞凋亡,采用Western印迹法检测足细胞损伤相关蛋白〔synaptopodin、结蛋白(desmin)〕及细胞凋亡蛋白(Bcl-2、Bax、酶切caspase-3)表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-29a-3p与HDAC4的靶向关系。通过将HDAC4过表达质粒与miR-29a-3p mimic共同转染入HG组MPC5细胞,用Western印迹法与流式细胞术分别检测足细胞损伤相关蛋白、细胞凋亡蛋白及细胞凋亡率。结果与NG组相比,HG组肾脏足细胞MPC5中miR-29a-3p表达水平、synaptopodin及Bcl-2蛋白表达均显著降低(均P<0.05),而HDAC4、desmin、Bax、酶切caspase-3蛋白表达水平及细胞凋亡率均明显升高(均P<0.05);转染miR-29a-3p mimic后,MPC5细胞中synaptopodin、Bcl-2蛋白表达均明显增加(均P<0.05),而desmin、Bax、酶切caspase-3蛋白表达及细胞凋亡率均明显降低(均P<0.05);抑制HDAC4表达可减轻高糖刺激肾脏足细胞MPC5损伤,抑制MPC5细胞凋亡;双荧光素酶报告基因验证HDAC4是miR-29a-3p的靶基因;转染HDAC4过表达后MPC5细胞凋亡率、desmin及促凋亡蛋白表达均明显升高(均P<0.05),synaptopodin及Bcl-2蛋白表达均明显降低(均P<0.05)。结论miR-29a-3p在高糖诱导的小鼠足细胞中表达水平降低,上调miR-29a-3p表达可通过抑制靶基因HDAC4表达进而抑制足细胞凋亡从而减轻高糖诱导的足细胞损伤。