基于TRPV4通路探讨针刀对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

Effect of Acupotomology on Chondrocyte Apoptosis in Rabbit Knee Osteoarthritis Based on TRPV4 Pathway

目的观察针刀对膝骨关节炎(KOA)兔软骨香草素受体亚家族4(TRPV4)通路调控作用及软骨细胞凋亡的影响。方法选取6月龄健康雄性新西兰兔24只,采用随机数字表法分为空白组、模型组和针刀组,每组各8只。采用改良Videman法左后肢伸直位石膏固定6周制备KOA兔模型。针刀组选取经筋病灶点“鹤顶次”“髌外上”“髌内上”“髌外下”“髌内下”“阴陵上”行针刀松解治疗,每周1次,共治疗4次;空白组和模型组不予处理。采用苏木素-伊红(HE)染色及Mankin’s评分评价软骨形态学改变;采用原位缺口标记法(Tunel)检测软骨细胞凋亡率;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫印迹(Western blot)检测软骨TRPV4、半胱氨酸天冬酰胺酶-3(Caspase-3)分子表达情况。结果与空白组比较,模型组软骨表面不光滑,部分缺损,细胞分布不均匀,潮线紊乱,Mankin's评分明显增高(P<0.05);细胞凋亡率及TRPV4、Caspase-3 mRNA和蛋白表达均明显提高(P<0.05)。与模型组比较,针刀组软骨表面较光滑,细胞排列较整齐,软骨细胞数量增多,潮线较完整,Mankin's评分明显降低(P<0.05);细胞凋亡率及TRPV4、Caspase-3 mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论基于经筋理论针刀循膝周常见经筋病灶点松解能减少KOA兔软骨细胞凋亡,延缓软骨退变,其作用机制可能与抑制TRPV4通路,下调TRPV4、Caspase-3分子表达有关。