下调miR-372靶向调控BTG1表达对胶质瘤细胞分泌免疫抑制因子的影响

目的研究miR-372靶向调控B细胞易位基因(BTG)1的表达对胶质瘤细胞分泌免疫抑制因子的影响。方法Realtime PCR方法测定胶质瘤细胞和正常星形胶质细胞中miR-372表达变化。在胶质瘤细胞中转染miR-372抑制剂(inhibitor),Realtime PCR方法检测下调效果,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞培养液上清中转化生长因子(TGF)-β1、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素(IL)-8含量。利用生物信息学软件预测miR-372的靶基因可能为BTG1,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。Western印迹检测miR-372 inhibitor对胶质瘤细胞中BTG1蛋白表达影响。在胶质瘤细胞中共转染BTG1 siRNA和miR-372 inhibitor,检测细胞培养液上清中TGF-β1、VEGF、IL-8含量和细胞中BTG1蛋白水平。结果胶质瘤细胞中miR-372表达水平高于正常星形胶质细胞。转染miR-372 inhibitor后的胶质瘤细胞分泌的TGF-β1、VEGF、IL-8含量显著减少。miR-372靶向调控BTG1。转染miR-372 inhibitor后的胶质瘤细胞中BTG1蛋白水平显著升高。BTG1 siRNA可以逆转miR-372 inhibitor对胶质瘤细胞分泌TGF-β1、VEGF、IL-8的抑制作用和BTG1蛋白表达的促进作用。结论下调miR-372靶向调控BTG1的表达抑制胶质瘤细胞分泌免疫抑制因子TGF-β1、VEGF、IL-8。