高糖条件下TGF-β1对SW620结肠癌细胞PD-L1表达及EMT的影响

为明确ERK和AKT在TGF-β调节PD-L1和EMT中所起的作用,本实验用TGF-β1处理SW620细胞15、30、60min后,Western blot检测ERK和AKT的磷酸化水平;SW620细胞中加入ERK和AKT抑制剂预处理30min后加入TGF-β1共同培养48h,Western blot检测PD-L1蛋白和EMT相关标志物E-cadherin、Vimentin和Snail的表达;用含30mmol/L葡萄糖的L-15培养基培养SW620细胞,模拟体内高糖环境,以ROS诱导剂作为高糖培养的阳性对照,设置不处理的对照组、TGF-β1组、高糖组、ROS诱导剂组和高糖+TGF-β1组,Western blot检测培养48h后PD-L1蛋白和EMT相关标志物E-cadherin、Vimentin和Snail的表达。