针灸通过调节Hcn1通道蛋白及膀胱上皮细胞Ca^(2+)浓度抑制膀胱过度活动症的机制研究

目的通过观察膀胱过度活动症模型(DO)大鼠中Hcn1通道蛋白及膀胱上皮细胞Ca^(2+)浓度的表达情况,探讨针灸通过调节Hcn1通道蛋白及膀胱上皮细胞Ca^(2+)浓度抑制膀胱过度活动症的机制。方法除正常对照组外,其他两组试验大鼠;膀胱颈结扎法制备OAB大鼠模型实验大鼠随机分为正常对照组、模型对照组和针灸治疗组。尿动力学检测评估模型构建是否成功;常规生物学方法进行RNA提取质控,后期建库测序,数据分析采用R平台完成;q-PCR和Western blot验证测序结论;无菌条件下分离、培养膀胱上皮细胞,观察细胞Ca^(2+)浓度测定。结果尿动力学检测显示OAB模型构建成功;样本的RNA-seq测序结果及后续q-PCR验证OAB模型大鼠膀胱组织Hcn1离子通道活性降低的;Western blot检测结果证实Hcn1通道蛋白在OAB模型大鼠中的表达被抑制(P<0.001);针灸组的Hcn1通道蛋白表达比模型组明显提高(P<0.001);膀胱上皮细胞的Ca^(2+)浓度与模型组比较,针灸治疗组的大鼠逼尿肌细胞Ca^(2+)浓度明显减少(P<0.05)。结论针灸能够通过提高Hcn1通道蛋白以及降低膀胱上皮细胞Ca^(2+)浓度,以达到抑制膀胱过度活动症的效果。