基于iTRAQ 技术的肾虚体质、脾虚体质大鼠唾液蛋白表达差异研究

目的制备肾虚体质、脾虚体质模型大鼠并收集唾液,采用iTRAQ蛋白组学研究方法,探讨不同病理体质下,唾液蛋白的差异表达。方法采用“猫吓鼠”造模法制备先天不足+后天失养复合型肾虚质组;采用饮食不节+劳倦过度法制备脾虚质组;对比平和质组观察大鼠生长发育、唾液pH值、蛋白表达差异。结果肾虚质组8周龄体重、脾虚质组6周龄、8周龄体重低于平和质组(P<0.01)。肾虚质组、脾虚质组唾液pH值较平和质组升高(P<0.01),但二者组间比较差异无统计学意义。以P-value<0.05且Fold Change<0.83或Fold Change﹥1.2为筛选标准筛选差异蛋白,对差异蛋白进行GO分类、KEGG通路的富集度、PPI网络构建分析发现,Fgg(纤维蛋白原γ链)、Apoa1(载脂蛋白A-I)、B2m(β-2-微球蛋白)、Serpina1(α1抗胰蛋白酶)、Clu(丛生蛋白)这五种蛋白不仅在蛋白质相互作用中处于关键位置,且与平和质、脾虚质组比较,这五种蛋白在肾虚质组中出现明显下调;而Actb(细胞质肌动蛋白)、Vim(波形蛋白)、Lcn2(中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白)三种蛋白在肾虚体质出现明显上调,提示这8种蛋白的变化与肾虚体质密切相关。结论在肾虚质、脾虚质状态下,大鼠生长发育、唾液pH值和蛋白质表达发生不同变化。唾液虽为脾肾共同所主,但通过iTRAQ技术筛选出的差异蛋白,可作为不同体质的生物学标志和模型辨识基础。