基于NF-κB/MAPK信号通路探讨大黄灵仙方干预胆管细胞炎性反应的机制研究

目的研究大黄灵仙方对胆道炎症大鼠模型p-p38MAPK、p-NF-κB信号通路表达水平的影响,探讨其缓解胆管细胞炎症反应的机制。方法大鼠胆总管一次注射5mg/kg脂多糖(LPS)构建肝内胆管感染动物模型。按随机数字表法将大鼠分为空白对照组、LPS对照组、LPS+中药组、LPS+PDTC组、LPS+SB203580组、LPS+PDTC+SB203580组、LPS+PDTC+中药组、LPS+SB203580+中药组、LPS+PDTC+SB203580+中药组。中药组予中药大黄灵仙方(DHLX)灌胃,其余组予蒸馏水灌胃,配合使用p38MAPK阻断剂(SB203580)、NF-κB阻断剂(PDTC),截取胆管周围组织,HE染色观察其炎性程度,Western blot测定胆管组织中p-p38MAPK、p-NF-κB信号通路的蛋白表达水平。结果各组胆管组织HE染色显示LPS对照组、LPS+PDTC组、LPS+SB203580组、LPS+PDTC+SB203580组胆管炎症明显,加入DHLX干预后胆管炎症状态较前改善,总病理评分差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果表明胆管炎症大鼠胆管细胞中p-p38MAPK、p-NF-κB蛋白的表达水平,在LPS+PDTC组、LPS+SB203580组、LPS+PDTC+SB203580组显著高于空白组与LPS对照组(P<0.05);LPS+PDTC+中药组、LPS+SB203580+中药组、LPS+PTDC+SB203580+中药组p-p38MAPK、p-NF-κB水平则显著低于LPS+PDTC组、LPS+SB203580组、LPS+PDTC+SB203580组(P<0.05);LPS对照组中p-p38MAPK蛋白的表达水平与空白对照组相比无明显变化(P>0.05),而p-NF-κB蛋白的表达水平在LPS对照组显著高于空白对照组(P<0.05),LPS+中药组的p-NF-κB表达水平与LPS对照组相比有所降低,但无明显差异(P>0.05)。结论大黄灵仙方能缓解胆管细胞炎症反应,其作用机制可能与调节p-p38MAPK、p-NF-κB信号通路介导的蛋白失衡有关。