TGF增强剂及抑制剂在POP阴道壁成纤维细胞中细胞外基质蛋白的表达研究

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)增强剂及抑制剂对盆腔器官脱垂(POP)患者阴道壁成纤维细胞中细胞外基质(ECM)蛋白表达的影响。方法:选择Ⅳ度POP患者阴道前壁组织并行原代培养,经过TGF-β1增强剂(TGF-β1过表达质粒转染)及TGF-β1、TGF-βRI/II、Smad3抑制剂干预后,采用蛋白印迹(Western Blot)和荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)实验方法,对空白对照组、空载对照组(空载质粒CON238转染)及TGF-β1增强剂组和3种抑制剂组的5种ECM蛋白[纤维蛋白(Fibulin-5)、赖氨酰氧化酶(LOX)、弹性蛋白(Elastin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及MMP-9蛋白]的表达水平进行检测并比较。结果:RT-PCR和Western Blot检测示,TGF-β1增强剂干预后,Fibulin-5、LOX的表达显著上调,与空载对照组和空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);而3种抑制剂处理后显著下调,与TGF-β1增强剂组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Western Blot检测示,Elastin的表达与Fibulin-5、LOX的表达基本一致。RT-PCR和Western Blot检测示,各种干预后MMP-2、MMP-9的表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:Fibulin-5、LOX和Elastin的表达随TGF-β的变化而变化,TGF-β1在阴道壁成纤维中ECM代谢中可能起关键调控作用,可能参与了POP的发生和发展。MMP-2、MMP-9表达的相对稳定,可能与疾病状态有关,也可能与种族和遗传有关,因体外无活性,可能体内需要相关激活。