ASPM对肝癌QGY-7703细胞的增殖、凋亡和迁移的影响

目的研究ASPM在肝癌细胞增殖、凋亡及迁移的作用及其机制。方法通过合成siRNA沉默ASPM在肝癌细胞株QGY-7703的表达,再通过CCK8,克隆形成实验检测其生长能力的改变;流式细胞术检测其凋亡水平的改变;Transwell迁移实验检测其迁移能力的改变,qRT-PCR检测EMT相关分子E-cadherin,N-cadherin,Snail以及线粒体相关基因COX1,ND1,ND6,COXIV,TOMM20的的表达水平的改变;通过MitoTracker^(TM) Red CMXRos检测肝癌细胞QGY-7703的线粒体活性,MitoTracker^(TM) Green检测线粒体的数量的改变;ATP检测试剂盒检测细胞内ATP的生成水平的改变;Western blotting检测TGF-β/Smad3信号通路活性的改变。结果沉默ASPM可抑制QGY-7703的增殖能力和克隆形成能力,促进了其凋亡水平;同时,可抑制肝癌细胞QGY-7703的迁移能力,并促进E-cadherin的mRNA表达水平,抑制N-cadherin,Snail的mRNA表达水平;流式结果显示,沉默ASPM后,线粒体ROS的水平明显上升,反应线粒体数目的MitoTracker^(TM) Green的平均荧光强度明显下降,ATP产量也明显下降,而线粒体相关基因COX1,ND1,ND6,COXIV,TOMM20的表达水平明显下降;Western blotting的结果显示,沉默ASPM的表达水平可抑制TGF-β/Smad3信号通路的活性。结论ASPM通过TGF-β/Smad3信号通路导致线粒体的发生及活性增强,从而促进肝癌细胞的增殖和迁移。