基于苯乙醇苷类天然分子探针的抗脑缺血新靶点发现

目的缺血性脑卒中是威胁人类生命健康的重大疾病,目前严重缺乏有效的药物靶点。肉苁蓉是我国著名的补益中药,被称为“沙漠人参”。研究发现,肉苁蓉具有良好的脑保护作用,其中苯乙醇苷是其主要药效成分。我们设想:是否可以利用代表性的苯乙醇苷类成分——松果菊苷(ECH)作为活性分子探针,从神经细胞中“钩钓”其直接作用靶点,并揭示其发挥神经保护作用的分子药理机制。方法以ECH作为分子探针,利用键合有ECH的固相载体从神经细胞裂解液中捕获其直接作用靶点并进行高分辨质谱鉴定,同时结合化学生物学及分子药理学方法探究其调控神经细胞缺血性损伤的分子信号通路。结果揭示了ECH的作用靶点为酪氨酸激酶α′催化亚基(CK2α′),且CK2α′通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进线粒体融合,发挥抗神经细胞缺血性损伤的作用。此外,在CK2α′WT和CK2α′+/-小鼠MCAO模型上也证实了ECH通过靶点CK2α′发挥改善脑缺血的作用。结论揭示了ECH的直接作用靶点为CK2α′,同时也提示CK2α′是一个基于天然活性分子探针发现的新颖的脑缺血治疗靶点,为今后缺血性脑卒中先导药物的发现提供了新思路。