圣路易斯脑炎病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为建立快速检测圣路易斯脑炎病毒(St.Louis encephalitis virus,SLEV)的TaqMan荧光定量RT-PCR方法。根据圣路易斯脑炎病毒非结构蛋白NS5基因保守序列,成功重构TaqMan探针与特异性引物,利用实时荧光定量(RT-PCR)技术对此脑炎病毒进行检测。运用重组质粒pUC57-NS5标准品完成标准曲线绘制,该标准品包括了选定检测序列,对应的相关系数则是0.9999,敏感性则为661 copies·mL-1。本研究中,圣路易斯脑炎病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法与同种属的西尼罗病毒、登革热病毒、乙型脑炎病毒和黄热病毒无交叉反应。该方法可以为圣路易斯脑炎病毒的流行病学调查和传染病监测提供一种技术基础。