增溶型白桦脂酸纳米制剂的制备及其在体内外抑制乳腺癌生长的作用及机制

目的制备增溶型白桦脂酸(BA)纳米制剂,并探讨其在体内外抑制乳腺癌生长的作用及机制。方法以Soluplus为载体,采用薄膜水化法制备包载BA的纳米制剂(Soluplus-BA)并进行表征;MTT法检测Soluplus-BA制剂和游离BA对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响;DCFH-DA和JC-1染色检测Soluplus-BA对细胞活性氧和线粒体膜电位的影响;γ-H2AX免疫荧光染色检测Soluplus-BA对细胞DNA损伤的影响;HUVEC细胞成管实验和鸡绒毛尿囊膜(CAM)实验检测Soluplus-BA是否可抑制血管新生;Western印迹法检测相关信号通路蛋白的表达;小鼠移植瘤实验检测Soluplus-BA在体内的抗肿瘤活性。结果制备的Soluplus-BA制剂的平均粒径为(54.77±1.26)nm,多分散指数(PDI)为0.083,并在9个月内存储稳定性好。MTT测定结果显示,Soluplus-BA制剂增强了BA对MDA-MB-231细胞生长的抑制作用,IC_(50)分别为(38.81±4.9)mg·L^(-1)(Soluplus-BA)和(15.45±3.01)mg·L^(-1)(BA)。Soluplus-BA制剂可通过诱导MDA-MB-231细胞活性氧的积累和线粒体膜电位的破坏发挥抗肿瘤作用。免疫荧光结果显示γH2AX荧光斑点的增加,表明Soluplus-BA制剂诱导了DNA双链断裂。Soluplus-BA制剂还抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的小管形成和迁移,并抑制鸡绒毛尿囊膜的新生血管形成。Western印迹法结果显示,Soluplus-BA通过抑制HIF-1/VEGF-FAK信号通路发挥抑制血管新生活性。小鼠体内结果显示,Soluplus-BA制剂显著抑制乳腺癌移植瘤的生长,抑瘤率高于游离BA。结论增溶型Soluplus-BA胶囊增加了BA在体内外的抗肿瘤活性,并调控HIF-1/VEGF-FAK信号通路。