复方利血平氨苯蝶啶片降压作用机制的网络药理学分析及验证研究

目的复方利血平氨苯蝶啶片是用于临床治疗高血压病的复方降压药,由我国学者研发,在临床应用多年,但其降压作用机制仍有待阐释。本文通过网络药理学分析其降压作用机制并在细胞水平进行初步研究验证。方法本文利用Swiss TargetPrediction数据库获得复方利血平氨苯蝶啶片中利血平、氨苯蝶啶、氢氯噻嗪和硫酸双肼屈嗪4种化学成分的作用靶点;通过TTD、OMIM数据库查找并获取高血压病的相关蛋白靶标;利用蛋白互作网络分析数据库构建复方利血平氨苯蝶啶片-高血压病网络模型;通过Metascape数据库对潜在靶点进行GO富集分析和通路富集分析;采用人脐静脉内皮细胞和血管平滑肌细胞分别经血管紧张素Ⅱ1μmol·L^(-1)诱导处理,低中高浓度复方利血平氨苯蝶啶片原料(0.01,0.1和1μmol·L^(-1))进行干预,Western印迹法检测人脐静脉内皮细胞中PI3K/Akt/eNOS通路和血管平滑肌细胞中cGMP/PKG通路的变化。结果网络药理学结果表明,复方利血平氨苯蝶啶片可能通过参与管径调节、血管张力调节、全身动脉血压的负向调节、肾上腺素受体激活、蛋白激酶活性等实现降压,降压过程中可能涉及cGMP/PKG信号通路、血管平滑肌收缩、调控神经活动的配体-受体相互作用、心肌细胞肾上腺素信号传导、钙信号通路等信号通路。细胞水平的研究结果证明,复方利血平氨苯蝶啶片处理后,可以升高人脐静脉内皮细胞中p-PI3K、p-Akt、p-eNOS以及血管平滑肌细胞中eNOS、p-VASP、PKG蛋白水平。结论复方利血平氨苯蝶啶片有效地控制血压,预防和减少心血管事件是通过多靶点、多通路发挥降压作用,进一步研究证实,激活PI3K/Akt/eNOS通路诱导内皮依赖的NO/cGMP/PKG信号,从而舒张血管可能是其重要作用机制之一。