黑曲霉GOD基因在枯草芽孢杆菌中的表达

通过初筛和复筛,筛选出高产GOD的黑曲霉菌种(Aspergillus niger),提取黑曲霉的基因组DNA,以此为模板扩增GOD基因,将目的基因密码子优化后,插入表达载体pT7M,导入枯草芽孢杆菌7024E中,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表达情况,旨在研究黑曲霉葡萄糖氧化酶(GOD)基因在枯草芽孢杆菌中的表达。试验结果显示,成功筛选出1株高产GOD的黑曲霉菌株(P-1),从其基因组中克隆了GOD基因,该基因序列全长1 818 bp,编码605个氨基酸;构建了表达载体并转化至宿主,构建重组GOD基因枯草芽孢杆菌,2%木糖诱导发酵,SDS-PAGE和Western-blot检测到重组枯草芽孢杆菌能够表达GOD。表明GOD基因在野生型枯草芽孢杆菌中获得了成功表达。