抗O型口蹄疫兔化弱毒YNTBa株单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定

为建立O型口蹄疫病毒(FMDV)检测方法,用纯化的O型FMDV兔化弱毒YNTBa株抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合;经间接ELISA方法筛选,获得一株稳定分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株9B3,其细胞培养上清效价为1∶25600,小鼠腹水效价为1×10^(6),抗体亚类为IgG2a/κ。经免疫荧光(IFA)和病毒中和试验(VNT)鉴定,9B3为一株抗O型FMDV型特异性mAb,但无中和活性;Western-blot结果显示,9B3不与YNTBa全病毒抗原反应,表明其识别非线性抗原表位。经硫氰酸盐洗脱法测定,9B3的相对亲和力指数为1.0 mol/L。这株单抗的获得为O型FMDV抗原表位研究及检测方法的建立奠定了基础。