摘要
目的研究微小RNA(miR)-137通过靶向无翅和整合位点生长因子5a(Wnt5a)抑制宫颈癌细胞生长及其作用机制。方法采用qPCR检测宫颈癌细胞HeLa、C33A、Caski中miR-137和Wnt5a mRNA的表达水平。Targetscan7.1预测软件及双荧光素酶报道基因试验检测miR-137靶向调控Wnt5a基因。常规培养宫颈癌细胞HeLa,分为NC组、miR-137 mimic组和miR-137 mimic+oe-Wnt5a组,采用脂质体2000进行各组细胞的转染。采用CCK-8实验、平板克隆和EdU实验检测各组细胞的增殖活性。Western印迹检测各组细胞中Wnt/β-catenin信号通路的表达。结果与Wnt5a-wt+NC共转染组相比,Wnt5a-wt+miR-137共转染组的荧光素酶活性显著降低(P<0.05)。与NC组Wnt5a mRNA表达相比,miR-137 mimic组和miR-137 mimic+oe-Wnt5a组均显著降低,且miR-137 mimic组显著低于miR-137 mimic+oe-Wnt5a组(均P<0.05)。与NC组相比,miR-137 mimic组和miR-137 mimic+oe-Wnt5a组细胞增殖活性显著降低(P<0.05)。而与miR-137 mimic组相比,miR-137 mimic+oe-Wnt5a组细胞增殖活性显著增加(P<0.05)。与NC组相比,miR-137 mimic组和miR-137 mimic+oe-Wnt5a组细胞平板克隆形成能力显著降低(P<0.05)。而与miR-137 mimic组相比,miR-137 mimic+oe-Wnt5a组细胞平板克隆形成显著增加(P<0.05)。与NC组相比,miR-137 mimic组和miR-137 mimic+oe-Wnt5a组细胞Edu阳性细胞率显著降低(P<0.05)。而与miR-137 mimic组相比,miR-137 mimic+oe-Wnt5a组细胞Edu阳性细胞率显著增加(P<0.05)。与NC组相比,miR-137 mimic组和miR-137 mimic+oe-Wnt5a组细胞中Wnt5a和β-catenin蛋白表达显著降低(P<0.05),而与miR-137 mimic组相比,miR-137 mimic+oe-Wnt5a组细胞中Wnt5a和β-catenin蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论miR-137靶向调控Wnt5a表达抑制宫颈癌细胞生长。
出处
《中国老年学杂志》
CAS
北大核心
2021年第24期5648-5652,共5页
Chinese Journal of Gerontology
基金
内蒙古自治区自然科学基金项目(2016MS0278)。