PDLIM7⁃NEDD4⁃1信号通路参与骨骼肌萎缩修复的分子机制及肾衰营养胶囊干预作用

目的:探讨PDLIM7⁃Nedd4⁃1通路在慢性肾功能衰竭(CRF)营养不良发病中骨骼肌萎缩的作用机制及肾衰营养胶囊的干预机制。方法:制备CRF营养不良大鼠模型,将判断为CRF营养不良的大鼠20只随机分为两组,肾衰营养胶囊组(实验组),另设假手术对照组;用组织贴壁法体外培养MSC及C2C12;HE染色测肌管横径;免疫荧光检测分化标记物;平板克隆实验检测细胞克隆形成率;用MTT法检测细胞活性;细胞计数试剂盒(CCK⁃8)检测各组细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期分布;Western印记法检测ODPDLIM7⁃NEDD4⁃1信号通路蛋白的表达。结果:利用LV5慢病毒包装系统进行对照组和高表达PDLIM7慢病毒颗粒的包装,GFP荧光蛋白表达良好。与对照组相比,实验组的PDLIM7蛋白表达量增高(0.439±0.024 vs 0.591±0.022,P<0.01),NEDD4⁃1表达量下调(0.249±0.032 vs 0.676±0.053,P<0.01);C2C12的增殖速度增快(0.97±0.13 vs 0.55±0.08,P<0.05);高表达PDLIM7基因后C2C12细胞S期细胞所占比例明显增多(26.94±3.48%vs 12.50±1.66%,P<0.01)。结论:PDLIM7⁃NEDD4⁃1信号通路参与蛋白质代谢和骨骼肌萎缩修复过程,肾衰营养胶囊可能上调PDLIM7蛋白的表达,抑制NEDD4⁃1表达量,进而促进骨骼肌萎缩修复过程。