加味四逆散增强CUMS大鼠应激弹性的miR—124—海马神经发生机制研究

目的探讨加味四逆散对慢性不可预计轻度应激(Chronic unpredictable mild stress, CUMS)大鼠应激弹性的影响及其miR-124—海马神经发生作用机制。方法根据糖水偏爱度将大鼠随机分成正常组(CON)、模型组(CUMS)、加味四逆散组(16.9 g·kg^(-1)),每组20只。采用慢性不可预计轻度应激建立8周CUMS大鼠模型。采用糖水偏爱实验(SPT)、旷场实验(OFT)、强迫游泳实验(FST)观察大鼠的行为学变化;采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马RE1-沉默转录抑制因子(RE1-silencing transcription repressor, REST)、羧基端小结构域磷酸酶1(Small C terminal domain phosphatase 1,SCP1)的含量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法(qRT-PCR)检测大鼠海马miR-124、REST mRNA及SCP1 mRNA的表达;采用免疫荧光标记实验检测大鼠海马DG区Brdu-DCX、NeuN的表达。结果与CON组相比,CUMS组大鼠糖水偏爱度明显下降(P<0.01),OFT自发活动显著降低(P<0.01),FST不动时间显著延长(P<0.05),海马DG区Brdu-DCX、NeuN标记的阳性细胞数明显减少(P<0.01,P<0.01),海马REST、SCP1蛋白含量明显增加(P<0.01,P<0.05),海马miR-124含量显著减少(P<0.05),REST mRNA、SCP1 mRNA含量显著增加(P<0.01,P<0.01)。与CUMS组相比,加味四逆散可显著提高大鼠糖水偏爱度(P<0.01)、增加OFT总路程(P<0.01),缩短FST不动时间(P<0.05);加味四逆散能明显提升组内应激弹性大鼠所占的比例;显著提升CUMS大鼠海马DG区Brdu-DCX、NeuN标记的阳性细胞数(P<0.01;P<0.01);显著降低海马REST、SCP1蛋白含量(P<0.05,P<0.05);显著提升CUMS大鼠海马miR-124含量(P<0.01)、降低REST mRNA含量、SCP1 mRNA含量(P<0.05,P<0.01,P<0.05)。结论加味四逆散能明显改善CUMS大鼠行为学异常并显著提高应激弹性大鼠所占比例,其可能的机制是通过REST-SCP1环路调控miR-124含量进而促进海马神经发生。