炮制对雷公藤诱导的睾丸生殖毒性的减毒作用机制研究

目的考察不同炮制方法对雷公藤诱导的睾丸生殖毒性的减毒作用,并初探其减毒机制。方法在分别采用醋炙法、清炒法、以及煎汤(以金钱草、绿豆、白芍、甘草各自煎汤)炒炙法制备雷公藤各炮制品的基础上,通过对生殖毒性敏感指标血清睾酮的检测分析评价不同炮制方法对雷公藤灌服雄性小鼠28 d诱导的睾丸生殖毒性的减毒作用,进一步采用蛋白免疫印迹法和试剂盒方法通过对小鼠睾丸部分凋亡和氧化/抗氧化相关指标的检测分析初步评价其炮制减毒机制。结果雷公藤生品给药显著降低了小鼠血清睾酮的水平,醋炙法以及分别以金钱草、绿豆、白芍、甘草煎汤炒炙法炮制均能够使被雷公藤降低的血清睾酮水平显著逆转69.9%、122.4%、75.2%、101.4%、106.6%,而清炒法炮制对此无显著影响;进一步分析表明,雷公藤生品给药显著升高了小鼠睾丸丙二醛水平、以及Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平,并显著降低了睾丸总超氧化物歧化酶、微量还原型谷胱甘肽、谷胱甘肽-过氧化物酶、谷胱甘肽-S转移酶的水平、以及B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达水平,醋炙法以及分别以金钱草、绿豆、白芍、甘草煎汤炒炙法炮制均显著逆转了以上指标的异常,而清炒法炮制对这些指标的异常无显著影响。结论醋炙法以及分别以金钱草、绿豆、白芍、甘草煎汤炒炙法炮制对雷公藤诱导的小鼠生殖毒性均具有减毒作用,不同炮制方法的减毒作用由强到弱依次为金钱草煎汤炒炙法、甘草煎汤炒炙法、白芍煎汤炒炙法、绿豆煎汤炒炙法和醋炙法,而清炒法未体现出显著减毒作用;炮制减毒机制可能与抑制睾丸细胞凋亡、以及纠正睾丸的脂质过氧化/抗氧化失衡有关。