六味地黄汤对皮质酮损伤小鼠HT22海马细胞保护作用

目的探讨六味地黄汤(LW)冻干粉对皮质酮诱导损伤的HT22海马细胞GPR30信号通路的影响。方法利用皮质酮构建慢性应激损伤HT22神经元细胞的体外模型,给予不同浓度的LW冻干粉,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HT22细胞的存活率并确定六味地黄汤最佳浓度。采用TUNNEL染色检测对照组、模型组和最佳六味地黄汤组细胞凋亡,酶联免疫吸附实验法检测细胞中雌激素含量,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测其G蛋白偶联雌激素受体(GPR30)mRNA的表达。结果与对照组比较,不同浓度的皮质酮组不同时间的OD值均有降低(P<0.05)。根据IC_(50)选择48h的皮质酮浓度和时间进行后续实验,并考虑取整及实验时间,因此采用2μmol·L^(-1)皮质酮干预48 h作为模型建立的条件。与模型组和其他浓度LW冻干粉组比较,在48 h,LW(320μg·ml;)+皮质酮组HT22细胞存活率明显上升(P<0.05)。故采用LW冻干粉剂量为320μg·ml^(-1)进行后续实验。与模型组比较,LW冻干粉(320μg·ml;)组凋亡细胞明显减少(22.09%±7.28%,7.72%±6.32%,P<0.05),GPR30 mRNA升高(P<0.05)。结论LW冻干粉对皮质酮损伤的HT22细胞起保护作用,其机制与GPR30有关。