狂犬病冻干灭活疫苗纯化与冻干工艺的建立

通过抗原纯化试验、冻干曲线的建立,解决阻碍狂犬病冻干灭活疫苗下游工艺规模化生产的问题。病毒液纯化试验,纯化方式采用凝胶过滤柱层析技术,比较不同上样量和不同洗脱流速下狂犬病毒蛋白与杂蛋白的分离效果、杂蛋白的去除率以及纯化效率;根据狂犬病冻干灭活疫苗的耐热保护剂配方的热参数科学设计冻干程序,通过物理性状、耐老化实验、残余水分等指标筛选冻干程序。结果显示,病毒液纯化以8%柱床体积上样,30~40 cm/hr的线性流速洗脱,目的蛋白峰和杂蛋白可以实现良好分离,杂蛋白去除率能达到93%以上;狂犬病冻干灭活疫苗溶液的共晶点为-28.6℃、当预冻温度为-42℃,主干燥温度为-13℃时为最优曲线,采用该程序制备的冻干灭活疫苗产品可在37℃保存10 d。