西藏牦牛肠出血性大肠杆菌HPI基因调查及耐药性分析

Investigation and drug resistance analysis of HPI gene of enterohemorrhagic Escherichia coli in Tibetan yak

为明确西藏牦牛源肠出血大肠杆菌强毒力岛(HPI)基因以及ESBLs耐药基因携带情况,复壮笔者所在实验室保存的14株牦牛源肠出血性大肠杆菌,采用麦康凯培养基和伊红美蓝培养基进行筛选,镜检确定复壮成功后,应用PCR方法检测HPI携带情况,并对HPI相关毒力基因进行克隆与序列分析,测序结果同时采用K-B纸片法对被检菌株进行药敏试验和ESBLs表型检测,最后应用PCR方法进行ESBLs耐药基因检测。结果显示,14株被检菌株中HPI标志性基因fyuA的携带率最高,达42.86%(6/14),其次分别为ybtA、irp2和irp8基因,携带率均为21.43%(3/14),irp3携带率为14.2%(2/14),而未检测到irp5阳性基因。分离菌株对青霉素、苯唑西林、氨苄西林、头孢氨苄、头孢唑林、头孢拉定、阿米卡星的耐药率均≥57.14%,对派拉西林、羧苄西林、头孢他啶、环丙沙星耐药率均≥21.43%,并存在多种耐药现象,耐药谱集中在3~10耐,其中6耐菌株最多,有5株,其次为8耐3株、7耐2株,10耐、9耐、5耐和3耐均1株。对被检菌株进行14种ESBLs类基因检测,结果发现被检菌株只携带1种ESBLs类基因,为bla;基因,携带率21.43%(3/14)。综上,西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌中存在HPI基因。对常用抗菌药产生较高的耐药性并存在多种耐药现象,但对ESBLs类药物具有较高的敏感性。