解毒化瘀颗粒对H_(2)O_(2)诱导LO2肝细胞炎症反应的影响

目的研究解毒化瘀颗粒对H_(2)O_(2)诱导LO2肝细胞损伤炎症反应的影响及其可能的作用机制,为慢加急性肝衰竭的防治提供理论基础。方法利用H_(2)O_(2)诱导LO2肝细胞损伤模型,用不同浓度解毒化瘀颗粒工作液进行干预,采用Hochest 33528染色观察细胞形态,Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡,RT-PCR检测细胞中炎症因子白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor,TNF-α)及Toll样受体4(Toll-like Receptors 4,TLR4)mRNA水平,Western blot检测信号通路蛋白磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶(phosphorylation-mitogen activated protein kinase,p-MAPKs)、磷酸化核转录因子κB(phosphorylation-nuclear factor kappa B,p-NF-κB),TLR4的表达水平。结果与对照组相比,经H_(2)O_(2)处理后,LO2细胞凋亡率明显上升(P<0.01),炎性因子IL-6、TNF-αmRNA水平显著升高(P<0.01),TLR4 mRNA水平亦显著升高(P<0.01)。p-MAPKs、p-NF-κB、TLR4的蛋白表达水平则显著降低(P<0.01)。经解毒化瘀颗粒工作液干预后,细胞凋亡率显著下降(P<0.01),炎性因子IL-6、TNF-αmRNA水平显著降低(P<0.01),TLR4 mRNA水平亦显著降低(P<0.01)。p-MAPKs、p-NF-κB、TLR4的蛋白表达水平则显著升高(P<0.01)。结论解毒化瘀颗粒对H_(2)O_(2)诱导LO2肝细胞的炎症反应具有保护作用,其机制可能与TLR/MAPKs/NF-κB信号通路有关。