猪伪狂犬病毒、经典型猪瘟、猪流行性腹泻病毒三重PCR检测方法的建立

本研究根据GenBank中的PRV UL27基因、CSFV ORF1基因和PEDV N基因的保守序列设计1对特异性引物,通过对三重PCR反应条件的优化,建立快速检测PRV、CSFV和PEDV的三重PCR方法,并对该方法的特异性和敏感性进行验证。结果表明:引物对PRV、CSFV、PEDV能进行特异性扩增,目的片段大小分别为401bp、213bp、518bp,三重PCR方法特异性好,对PRV、CSFV、PEDV的检测限分别为12pg、0.05pg、3.5pg。建立的三重PCR方法具有特异性强、敏感性较好、快速简便等特点,可用于这三种病毒的同时检测和鉴别诊断。