摘要
目的 研究miR-139-5p对肾癌(RC)细胞周期和增殖的影响和潜在机制。方法 以正常肾小管上皮细胞HK-2为对照,实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western印迹检测RC细胞系A498、786-O和SN12C-PM6中miR-139-5p和SLC39A7的表达;在786-O细胞中高表达miR-139-5p和敲减SLC39A7,Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、CyclinE和β-catenin蛋白表达水平,CCK-8法和流式细胞术分别检测细胞存活率和细胞周期,双荧光素酶报告系统验证miR-139-5p和SLC39A7的关系。结果 与NC组和miR-con组相比,miR-139-5p组miR-139-5p表达量显著上升(P<0.05),细胞存活率显著降低(P<0.05),CyclinD1和CyclinE表达量均显著降低(P<0.05),G0/G1期和G2/M期细胞百分比显著升高(P<0.05),S期细胞百分比显著降低(P<0.05)。与NC组和si-con组相比,si-SLC39A7组786-O细胞中SLC39A7、CyclinD1和CyclinE表达量显著下降(P<0.05),细胞存活率显著降低(P<0.05),G0/G1期和G2/M期细胞百分比显著升高(P<0.05),S期细胞百分比显著降低(P<0.05)。与miR-con组相比,miR-139-5p组WT-SLC39A7的萤火虫荧光素酶相对活性显著下降(P<0.05)。与miR-con组SLC39A7蛋白表达量相比,过表达miR-139-5p组显著下降(P<0.05);与anti-miR-con组SLC39A7表达量相比,anti-miR-139-5p表达组显著上升(P<0.05)。与miR-con组SLC39A7水平相比,过表达miR-139-5p可抑制786-O细胞中SLC39A7表达(P<0.05)。与miR-139-5p+pcDNA-con组相比,miR-139-5p+pcDNA-SLC39A7组的SLC39A7、CyclinD1和CyclinE表达量显著升高(P<0.05),细胞存活率显著升高(P<0.05),G0/G1期和G2/M期细胞百分比显著降低(P<0.05),S期细胞百分比显著升高(P<0.05)。与miR-con组786-O细胞中β-catenin表达水平相比,过表达miR-139-5p组显著降低(P<0.05);与miR-139-5p+pcDNA-con组786-O细胞中β-catenin表达相比,miR-139-5p+pcDNA-SLC39A7组显著升高(P<0.05)。结论 miR-139-5p靶向SLC39A7可能通过Wnt/β-catenin信号通路调控RC细胞周期和增殖。miR-139-5p是RC的潜在分子靶点。
出处
《中国老年学杂志》
CAS
北大核心
2022年第12期3063-3068,共6页
Chinese Journal of Gerontology